短鎖ペプチドタグを用いたリガンド−タンパク質間相互作用検出系の構築

私たちの研究室では、酵素などのレポータータンパク質を用いた新しいリガンド−タンパク質間相互作用検出法の開発を行っています（図）。ここでは、酵素などのレポータータンパク質を2回分割した短鎖のペプチド鎖をタグ（目印）として用い、このペプチドタグを、相互作用を調べたい対象のリガンドとタンパク質それぞれに配置します。このとき、リガンドとタンパク質が相互作用すると、その近接効果により、ペプチドタグ間がNative Chemical Ligation (NCL)反応（図右下）で連結します。ここに、元のタンパク質の片断片を加えて再構成させると、酵素活性が回復し、相互作用を検出することができます。　現在この方法で用いることが可能なレポータータンパク質の種類を増やすことや、細胞内での相互作用の検出へと展開しています。